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Protocolo para NIH 3T3

2012/11/14
células NIH3T3 se utilizan ampliamente en laboratorios de investigación para la virología , celular y los experimentos de biología molecular . La línea de células embrionarias de fibroblastos de ratón fue desarrollado por George Todaro y Howard Green en 1962 en la Universidad de Nueva York.

Células Mediano
NIH3T3 crecen adheridas a los platos de plástico en un grado centígrado incubadora de 37 ( 99 grados Fahrenheit ) . Su medio de cultivo es el medio de Eagle modificado de Dulbecco suplementado con 10 % de suero de ternera - . No el 10 % de suero fetal bovino que otras líneas celulares prefieren
Propagación

Divide NIH 3T3 cada 2 ó 3 días - es importante que no se permita a ser demasiado densa . Retire el medio de cultivo gastado y lavar el plato con tampón fosfato salino . Se incuban las células en tripsina para separar las células y controlar la separación con un microscopio . Cuando las células se redondean y se separan , ellos agitar suavemente con una pipeta . Añadir medio de crecimiento completo para detener la reacción enzimática . Re - placa de las células a 300.000 células por 10 cm ( 3,9 pulgadas) de plato .
Usos

NIH3T3 se utilizan para cultivar virus de la leucemia murina o funcionar como células inmovilizadas , o capas alimentadoras, que suministran factores de crecimiento necesarios para las células , tales como células madre y queratinocitos . Ellos fueron cultivadas en la seda de araña en los experimentos diseñados para descubrir biomateriales con potencial para la regeneración de tejidos .

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