La electroporación es un método para obtener el plásmido en bacterias . Las bacterias y el ADN se mezclan en un tubo y se expusieron a un campo eléctrico producido por una máquina de la electroporación . El campo eléctrico perfora pequeños agujeros en las bacterias , permitiendo que el ADN en las células . Las bacterias que llevan el ADN más eficiente son células electrocompetentes .
Método
Electrocompetent bacterias tales como E. coli se pueden producir a través de una serie de centrifugaciones repetidas, primero en eliminar su medio de crecimiento y reemplazarlo con agua ultra - pura , y, finalmente, para reemplazar el agua con glicerol . En las etapas finales de las bacterias se volvieron a suspender en un pequeño volumen de glicerol, dividido en tubos congelados en nitrógeno líquido y se almacenan a largo plazo en un -80 grados Celsius ( -112 grados Fahrenheit ) congelador.
Consideraciones
Este protocolo se realizan generalmente con grandes volúmenes que requieren grandes frascos , agitadores y centrífugas . Es fundamental que los pasos de almacenamiento de la cosecha a todos pueden realizar a temperaturas frías . Se debe utilizar agua ultrapura .