Los científicos vinculan el gen LacZ con un gen de interés , tales como la insulina , con un fragmento de ADN llamado un plásmido . Utilizan métodos de transfección químicos o eléctricos para obtener el plásmido en las células. Las células se ensayaron para determinar la expresión de LacZ de la beta - galactosidasa , que también va a marcar la presencia del gen de la insulina .
Fijación
Después de la transfección , las células se cultivan en una placa de Petri de plástico . Para el ensayo , se retira el medio de cultivo y las células se lavan con tampón fosfato salino ( PBS ) . Una solución de fijación fresca de formaldehído , metanol y glutaraldehído se utiliza para fijar las células durante dos minutos . El fijador se elimina y las células se lavan de nuevo con PBS.
X -gal
Una solución de tinción fresca que contiene X -gal , ferri -potasio y cianuro de potasio ferro - cianuro se añade a las células durante la noche. Las células se lavaron de nuevo con PBS, y si el gen LacZ está presente, el beta- galactosidasa se han escindido de la X -gal y las células serán azules .