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Lentiviral embalaje Protocolo

2012/12/19
Los científicos usan vectores lentiviral en células de ingeniería genética . Como lentivirus modificado , en lugar de la entrega de su propia información genética cuando infectan una célula , que entregan un gen de interés que se convierte en una parte del ADN celular , expresada por la célula . Lentivirus

Cuando los genes de lentivirus se integran en el ADN de la célula, la célula produce proteínas para fabricar más partículas virales . Estas proteínas virales se auto-ensamblan y se convierten en cápsides virales - virus de la cáscara externa . La célula también hace que un pedazo de ARN que contiene los genes necesarios para la fabricación de partículas virales más . Este ARN tiene una secuencia de un embalaje especial que las proteínas reconocen partículas y el paquete dentro de la cápside. Las partículas salen de las células, infectar nuevas células y repetir el ciclo.
Embalaje

Los científicos utilizan este proceso de embalaje para engañar a las partículas del virus modificados en empaquetar un gen de interés, tales como la proteína fluorescente verde (GFP ) . Crean un trozo de ADN - un plásmido - que contiene sólo la señal de empaquetamiento y el gen GFP . Plásmidos contienen genes separados para hacer más partículas .

Transfección

plásmidos se mezclan en un lípido o solución salina se colocan en las células que absorben el ADN y hacer que las partículas de virus para la recogida del medio de crecimiento . Las partículas que contienen únicamente la secuencia del gen de GFP , pueden infectar a otras células que se expresan GFP . Esas células no reciben los genes para hacer más virus , sin embargo , por lo que no se produce la replicación viral.

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